叶绿素含量测定（叶绿素含量测定实验数据）

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光密度测定：将叶绿素提取液置于紫外可见分光光度计或分光光度计中，选择适当的波长进行测定。一般可以选择440 nm和663 nm两个波长。分别测量样品溶液在这两个波长下的吸光度。

其中主要有：原子吸收光谱法：通过测定镁元素的含量，进而间接计算叶绿素的含量。分光光度法：利用分光光度计测定叶绿素提取液在最大吸收波长下的吸光值，即可用朗伯—比尔定律计算出提取液中各色素的含量。

叶绿素含量的测定方法：分光光度法。分光光度法是通过测定被测物质在特定波长处或一定波长范围内光的吸收度，对该物质进行定性和定量分析的方法。它具有灵敏度高、操作简便、快速等优点，是生物化学实验中最常用的实验方法。

利用(7)式或(9)式可计算叶绿素总量。叶绿体色素的提取液中除含有叶绿素a与b外，还含有叶黄素和胡萝卜素，因为叶黄素和胡萝卜素的吸收光谱均在蓝光区，故不会干扰叶绿素含量在红光区的分光光度法测定。

用滴管吸取乙醇，将滤纸上的叶绿体色素全部洗入容量瓶中。直至滤纸和残渣中无绿色为止。最后用乙醇定容至100ml，摇匀。取叶绿体色素提取液在波长665nm、645nm 和652nm 下测定吸光度，以95％乙醇为空白对照。

叶绿素的含量测定方法有多种，其中主要有：原子吸收光谱法：通过测定镁元素的含量，进而间接计算叶绿素的含量。

一般用95％的酒精和80％丙酮提取，或用酒精、丙酮和水的混合液提取色素并测定叶绿素含量。

根据叶绿体色素提取液对可见光谱的吸收，利用分光光度计在某一特定波长下测定其消光度，即可用公式计算出提取液中各色素的含量。

用叶绿体色素提取色素并测定叶绿素的含量。利用叶绿体色素能溶于有机溶剂的特性，可用 95%乙醇提取。分离色素的方法有多种，如纸层析、柱层析等。纸层析是其中最简单的一种。

叶绿素含量测定首先得提取叶绿体色素，叶绿体色素中含有叶绿体a，叶绿体b，胡萝卜素和叶黄素。在提取叶绿体色素时，我们使用不同的试剂，如丙酮，乙醇等有机物。当试剂不同时，所得到的结果也会不同。

叶绿素的含量测定方法有多种，其中主要有：原子吸收光谱法：通过测定镁元素的含量，进而间接计算叶绿素的含量。

叶绿素a的测定分光光度法如下：在一定量的水样中添加1%碳酸镁悬浮液1mL，充分搅匀，用玻璃纤维滤纸或微孔滤膜过滤。若不能立刻提取，将带样品的滤膜放人冰箱保存(1~2d)。

叶绿素a、b含量分光光度法叶绿素a、b在长波方面最大吸收峰分别位于663nm和645nm。

利用分光光度法测定叶绿素含量是依据Lambert-Beer定律，数学表达式为A=Kbc。其中，A为吸光度；K为吸光系数；b为溶液的厚度；c为溶液浓度。叶绿素a，b的丙酮溶液在可见光范围内的最大吸收峰分别在663nm和645nm处。

1、叶绿素含量的测定方法：分光光度法。分光光度法是通过测定被测物质在特定波长处或一定波长范围内光的吸收度，对该物质进行定性和定量分析的方法。它具有灵敏度高、操作简便、快速等优点，是生物化学实验中最常用的实验方法。

2、叶绿素含量的测定方法醋酸铜法醋酸铜法是一种常用的叶绿素含量测定方法。

3、用滴管吸取乙醇，将滤纸上的叶绿体色素全部洗入容量瓶中。直至滤纸和残渣中无绿色为止。最后用乙醇定容至100ml，摇匀。取叶绿体色素提取液在波长665nm、645nm 和652nm 下测定吸光度，以95％乙醇为空白对照。

4、酒精法测定叶绿素含量原理：将叶片样品用乙醇等有机溶剂提取叶绿素，然后用分光光度计在不同波长下测定叶绿素的吸光度，计算出叶绿素含量。

5、叶绿素含量的测定及计算结果如下：叶绿素a、b在红光区的最大吸收峰分别为663nm和645nm，可用以下联立方程求叶绿素溶液中的叶绿素a、b的含量。

6、叶绿素a和叶绿素b在645nm和663nm处有最大吸收，且两吸收曲线相交于652nm处。因此测定提取液在645nm、663nm、652nm波长下的吸光值，并根据经验公式可分别计算出叶绿素a、叶绿素b和总叶绿素的含量。

因为叶绿体中色素含有三种叶绿素，叶黄素，胡萝卜素，每种色素的吸光度是不一样的。所以有三种波长的光。

因为分光光度法的要求。测定叶绿素a含量需要利用分光光度计测定叶绿素提取液在最大吸收多个波长下的吸光值，即可用朗伯—比尔定律计算出提取液中各色素的含量。

测定叶绿素用四个波长的原因：要是不用吸收峰的波长，浓度与吸光度虽然也成正比，但是由于吸光度都很低，分光光度计精度不够，容易产生较大误差。单色分光光度法测定叶绿素含量时，要测定665和750nm处的吸光度。